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威尼斯官网生命科学研究所杨宇丰教授团队在NAR发表基因组编辑方法学高水平研究论文

发布日期:2020-03-31 发布者:生工学院


3月30日,37000cm威尼斯生工学院杨宇丰教授课题组在生物学领域国际权威期刊《Nucleic Acids Research》上(2018 IF 11.147)发表了题为《通过双链缺口辅以重组因子在多个物种中实现高效且低风险的基因编辑方法》( Efficient and risk-reduced genome editing using double nicks enhanced by bacterial recombination factors in multiple species)的研究论文。37000cm威尼斯为第一单位,37000cm威尼斯生工学院生命科学研究所助理研究员何小镇、助理研究员陈文锋、以及神经所克隆猴研究团队刘真研究员为论文共同第一作者,37000cm威尼斯生工学院生命科学研究所杨宇丰教授与中国科学院上海神经科学研究所克隆猴研究团队的孙强教授为论文共同通讯作者。

该课题研究人员合作开发出提高外源基因敲入效率的基因组编辑方法NEO(Nickase-based homologous recombination Enhanced by recOfar factors),该方法采用D10A Cas9n基因编辑手段的异侧双缺口或者同侧双缺口的方式起始基因编辑,避免了双链断裂(DSB)的诸多风险,同时通过引入细菌来源的同源重组因子,在斑马鱼、小鼠以及大鼠8个编辑位点中实现平均5倍基因编辑可遗传效率的提高。NEO可实现超过5.5 kb长度片段的敲入。此外,NEO在猴子早期胚胎中获得超过50%的基因敲入效率;在分裂能力极低的未激活人外周血淋巴细胞上能够实现超过20%的基因敲入效率。NEO通过平衡效率与安全性,极大丰富了活体基因编辑的手段和提高了基因编辑的可靠性。




论文链接:https://doi.org/10.1093/nar/gkaa195